黄仲恩, 孙梓彦, 李周周, 朱芯仪, 蒋春江, 李佳依, 孙行, 韦运富, 孙国瑛
湖南师范大学学报医学版. 2025, 22(6): 23-28.
目的 探讨亚精胺对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠肺组织细胞外基质(extracellular matrix,ECM)重塑的影响及调控机制。方法 构建ALI小鼠模型;采用Masson染色观察肺组织胶原沉积情况;采用Real time-PCR和Western blot分别检测肺组织和巨噬细胞中核因子红系2相关因子(Nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)、Kelch 样ECH 相关蛋白1(Kelch-like ECH associated protein 1,Keap1)、血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)、磷酸肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、磷酸化的PI3K(phosphorylated PI3K,p-PI3K)、有丝分裂原激活的蛋白激酶激酶1(mitogen-activated protein extracellular signal-regulated kinase kinase 1,MEK1)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(Phosphorylated Extracellular Signal-Regulated Kinase 1/2,p-ERK1/2)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP2)、MMP9、转化生长因子-β(transforming growth factor β,TGF-β)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinases-1,TIMP-1)、Smad2/3、I型胶原蛋白(collagenI) mRNA和蛋白的表达。结果 (1)Masson染色结果显示与亚精胺+ALI组相比,采用Nrf2激动剂预处理后的ALI组小鼠肺组织的胶原沉积明显减少。PCR结果显示亚精胺可降低ALI肺组织中Mmp2、Mmp9、Tgf-β mRNA的表达,升高Timp-1mRNA的表达;使用Nrf2抑制剂预处理后,ALI小鼠肺组织Mmp2、Mmp9、Tgf-β mRNA的表达增加,而TIMP-1mRNA的表达降低;而使用Nrf2激动剂,可降低肺组织Mmp9 mRNA的表达,增加Timp-1mRNA的表达。(2)亚精胺可增加ALI时肺组织PI3K和MEK蛋白;亚精胺可增加脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的巨噬细胞PI3K、p-PI3K、MEK1、P-ERK1/2的蛋白表达。与亚精胺+LPS组相比较,采用PI3K抑制剂后,亚精胺预处理LPS诱导的巨噬细胞中Nrf2表达降低,Keap1的表达升高,HO-1的表达降低;而使用MAPK抑制剂,LPS诱导的巨噬细胞中Nrf2、HO-1的表达上调;Keap1的表达降低。结论 亚精胺通过PI3K、MAPK等信号通路激活Nrf2-Keap1功能轴,抑制巨噬细胞激活,使细胞外基质生成减少,最终可抑制ALI小鼠肺组织病理性ECM重塑。